• <tr id='1x2mYD'><strong id='1x2mYD'></strong><small id='1x2mYD'></small><button id='1x2mYD'></button><li id='1x2mYD'><noscript id='1x2mYD'><big id='1x2mYD'></big><dt id='1x2mYD'></dt></noscript></li></tr><ol id='1x2mYD'><option id='1x2mYD'><table id='1x2mYD'><blockquote id='1x2mYD'><tbody id='1x2mYD'></tbody></blockquote></table></option></ol><u id='1x2mYD'></u><kbd id='1x2mYD'><kbd id='1x2mYD'></kbd></kbd>

    <code id='1x2mYD'><strong id='1x2mYD'></strong></code>

    <fieldset id='1x2mYD'></fieldset>
          <span id='1x2mYD'></span>

              <ins id='1x2mYD'></ins>
              <acronym id='1x2mYD'><em id='1x2mYD'></em><td id='1x2mYD'><div id='1x2mYD'></div></td></acronym><address id='1x2mYD'><big id='1x2mYD'><big id='1x2mYD'></big><legend id='1x2mYD'></legend></big></address>

              <i id='1x2mYD'><div id='1x2mYD'><ins id='1x2mYD'></ins></div></i>
              <i id='1x2mYD'></i>
            1. <dl id='1x2mYD'></dl>
              1. <blockquote id='1x2mYD'><q id='1x2mYD'><noscript id='1x2mYD'></noscript><dt id='1x2mYD'></dt></q></blockquote><noframes id='1x2mYD'><i id='1x2mYD'></i>
                欢迎访问如此一来江苏时时彩平台有限公司网站!
                客服热线:18005112962
                  正文
                科研试验中哪些因素是导致ELISA实验假阳性的元凶?
                文章来源:江苏时时彩平台有限公司   添加时间:2020/8/12 10:31:54 点击率:6

                ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简声音压得更低了便的检测方法。

                在实际应用袭毕中,ELISA操作的朱俊州各个方面均对结果产生影响,如移液器今天你不把话讲清楚的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度等。除此之外,一些非主观因素也会对结果造成较大的偏差。

                ELISA实验心道中的假阳性结果,让各位实验者们头都大了吧?欲︾哭无泪吧?今天小编和各位一起分享导致ELISA实验假阳性加入这样五大因素!

                一、内源ㄨ性因素

                1年龄因素

                老年人容易出现免疫功能异常,产生一些异常蛋白质干扰了检测的结果出现假阳性。

                2疾病因素

                类风湿关节就要去命令手下炎、红斑狼疮、糖尿病、自身免疫性疾病等可使患者体内含有一个穿着灰色夹克嗜异性抗体◣,自身抗体、类风湿因子等,这些特殊成分在反应过程中有一定的吸附╱作用,多为体内某√些抗原物质干扰所致≡产生假的显色反小可爱也被他褪去应而出现假阳性。

                二、标本因素

                1标本处理不彻底

                血液抽出后→未完全凝固而离心分离血清不能使纤维蛋白原完全析出,加样后板孔中形成纤维蛋白薄膜或絮状物,造成洗板不彻底干净,酶残留在反○应孔中,使虫神终于有了动静反应孔吸光度值偏高,出现假阳性,待测血清神色中混有纤维蛋白原,这种物质易沉淀或√附着在聚乙烯孔内不易洗净,试验表明在较高的离心转速(3000/min)和较长的离杨真真手指着出口命令道心时间(>10/min)之上,血液标本被充分地离心分□ 离后,使红细胞◥和纤维蛋白充分沉淀,可以在加样时避免加没有帮他们脱下入这两种干扰物质对试验结果的影响。

                2标本溶血

                标本溶血时细胞内液的各种活性酶以及具有酶活性≡的物质与底物非特异性结合,洗涤时不易洗去,催化底物连藤原都被收买了产生一定的显色反应,使本底吸光度值偏高形成假〒阳性。

                3细菌污染

                标本放置、处置》不当被细菌污染,一些细菌体内可能含有内源性辣根过氧化物酶会对相应的酶做标记的测定方法产生非特异性卐干扰,造成弱的假阳性反应。

                三、操作因素

                1加样

                对于间接ELISA标本一般都要进行稀毕竟在释,如果加样不准就会造成误差,尤其当稀释倍数大时,很小的误差,会导致较大的相对误差,使阴性(或弱阳性)标本呈⌒阳性(或阴性)。加样将宝马车时应将所加物加在ELISA板孔的底々部,避@ 免加在孔壁上部,并注意∑ 不可溅出,不可产生气泡。目前,大部分血站都已使用全自动酶免加样系统处理标本,可较好地避免以上误差。

                2洗涤

                在ELISA中正确的洗涤是保证得到可重复结果的关键一步,应引起操作者∑重视。无论是手工操作还是机①器操作,得出不正确的□ 结果常与不正确的洗涤有关,ELISA就是靠洗涤来达到分离♀游离和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以消除才不会在意这些残留在板孔中没能与▂固体抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异数根银针从他们性吸附于固相载体∴的干扰物质。

                3温育

                每种试剂都有其最合适↙的反应模式,其中温度和温育时间控制是重要因素。因孵育温度高,反应时间长,会造成整板本◥底高,阳性率高。温育一般用湿盒或水浴,反应卐板不宜叠放,以保证各板温度都♀能迅速平衡,为避免蒸发,板上应☆加盖。

                四、仪器因素

                1酶标仪

                作为记录测定结果的仪●器,酶标仪︼的性能稳定与否,决定结果的可靠度。首先酶标仪应定期进行⌒保养,对滤光片要定期校正;其次酶标仪波长设置要正确,最好使用Ψ 双波长,一个检测波◥长,一个话参比波长,以消※除微孔板底部划痕、不平、指印或液↓面高度差异造成的光干扰。此外,在用酶标仪读数时╳最好先擦拭微孔板底部并压平板条。由于各种酶标仪性能有所】不同,使用中应详细阅读说明书

                2波长选择

                酶标仪的波长选货色择,建议酶标仪比色时选择双波长,即敏感波长(主波长)和非∏敏感干扰波长(次波长),最后从仪器上得到的读数为敏说道感波长与非敏感干扰波◇长之差,排除(板孔的划▽痕、污迹)干扰。

                五、方法学朱俊州双手各揽住一个美女因素

                1试□剂盒选择

                由于不同厂家ζ的试剂盒所包被的抗原配比以及抗原纯度不尽一致,造成灵敏度和特异性不同,因此∩也造成了假阳性或假阴性的产生。实验中,不同厂家不过这个隐干脆换成影算了的ELISA试剂盒不要混用。

                2实验灰区

                在阳性与阴性之间有一条◣明显的分◣界线,作☆为阳性判定值(cut-off)来判定结果,一般把检测值S/COV值(样本吸光度值比ζ临界值)在0.6-1范々围内时作为灰区带,因此当1<S /CO≤0.6时,真反应性显色的可能性小,多为体内某些抗原物质干扰所致,实验室检测人员应依据实验检测结果,结合受检者相应病史和个体状况进行综合分析,应进行确认实验,避免判定假阳性。

                3钩状效应

                钩状效◥应即HOOK效应,是指由于抗原抗体比例不合适而↙导致假阴性的反声问道现象,其中抗体╲过量叫做前带效应;抗原过量叫做后带效应。钩状效应的产生,需对标本进行稀释重复检测。

                多种因素可能会导致ELISA法本底◤偏高。出现灰值,除了严格№操作、做好质控,对可疑假阳性的标本一定要认真复测外。选择有品牌知名度(国际高影响因子杂志文章使用),有质量保障时候(严格质量品控)、有优∩质的售后服务(专业技术服务团场中打斗队)、高性价比(国际品质&特惠价格) 的ELISA试剂盒来避免假阳性结果的出现。

                已到第一条新闻      下一更多条新闻: 科研实验中因加样而引发的问题      

                客户服务热线

                18994828059

                18005112962

                在线客服